對羥基苯甲酸酯類作為食品防腐劑被廣泛應用在各類食品中，是國際上公認的安全、高效、廣譜防腐劑，對霉菌、酵母、細菌有抗菌作用，因此被廣泛應用于食品的防腐。但大量攝入對羥基苯甲酸酯類會危害人體健康，因此其一直是guo家食品安全檢測抽查的重點項目。

根據(jù)《食品安全guo家標準 食品添加劑使用標準》 （GB 2760-2014），允許添加對羥基苯甲酸酯類防腐劑的食品種類有經表面處理的鮮水果和鮮蔬菜、果醬、醋、醬油、醬及醬制品、蠔油、果蔬汁類飲料、碳酸飲料等。其中，近幾年的guo家食品安全監(jiān)督抽檢，醬油和醋中對羥基苯甲酸酯防腐劑幾乎是必檢項目。

釀造醬油的樣品預處理

醬油的釀造，經歷蛋白質的水解、淀粉的水解、有機酸生成和酒精發(fā)酵多個階段，使醬油呈味、呈色、增香。醬油的顏色及味道一部分來源于醬油本身發(fā)酵過程，另一部分來源于醬油配兌過程中添加的多種添加劑，如增鮮劑、色素和甜味劑等。因此，釀造醬油是一種復雜基質的加工食品，樣品預處理的效果對其檢測成功至關重要。對于分析化學來說，在復雜基質中分離目標物和非目標物往往難度很大，其樣品前處理傳統(tǒng)手段含有多項冗長的操作步驟，效率低下，并且往往還無法達到理想的凈化效果。

現(xiàn)行的《食品安全guo家標準 食品中對羥基苯甲酸酯類的測定》（GB 5009.31-2016）中，針對氣相色譜法檢測的樣品預處理技術主要采用多次液液萃取+液液洗滌的技術，該方法操作繁瑣、檢測耗時長、有機溶劑消耗量大（其中包括消耗大量的易制毒化學試劑），且回收率較低、穩(wěn)定性差，另外凈化效果也不佳，往往存在著干擾檢測的雜質成分。而本公司針對釀造醬油這種復雜食品基質，開發(fā)出了釀造醬油中對羥基苯甲酸酯類色譜檢測預處理專用方法包，這個方法包所采用的雙柱SPE法可實現(xiàn)高效、穩(wěn)定可靠地從各種復雜基質的釀造醬油中提取、分離和凈化4種對羥基苯甲酸酯類（對羥基苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯和丁酯），消耗的有機溶劑僅為guo家標準的30%不到，不使用任何易制毒化學試劑，且在保證4種對羥基苯甲酸酯類同時80%以上回收率及小于5%重復性RSD的前提下，實現(xiàn)良好的凈化效果，大幅度減少對色譜柱及色譜管路污染、甚至堵塞情況，可以很好地保護色譜系統(tǒng)。接下來主要介紹一下本專用方法包。

產品組成

提取液：從醬油樣品中提取對羥基苯甲酸酯類；

萃取液：使對羥基苯甲酸酯類提取液中的雜質沉淀分離；

萃取管：管中的吸附劑可吸附萃取時沉淀的雜質；

凈化專用SPE柱（雙柱）：吸附醬油中不同種類的色素；

SPE淋洗液：將被SPE柱吸附的雜質淋洗出來；

SPE洗脫液：將被SPE柱吸附的目標物洗脫下來。

主要操作流程

1. 醬油樣品稱量：jing確稱取5g醬油樣品；

2. 分離提?。菏褂谩疤崛∫骸保袷幏蛛x提??；

3. 萃取：取試樣提取上清液進行萃取，使用“萃取管”和“萃取液”，類似于QuEChERS的操作；

4. 凈化：使用雙柱串聯(lián)的“凈化專用SPE柱”，上樣，用“SPE淋洗液”和“SPE洗脫液”進行SPE操作，洗脫液收集后旋蒸蒸干；

5. 殘留樣品用溶劑復溶，過濾后上氣相色譜檢測。

方法包與國標預處理技術對比

回收率高，穩(wěn)定性好

用本方法包對加標的釀造醬油進行預處理后，色譜法測得的對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯和對羥基苯甲酸丁酯的回收率一般在80%~105%之間，四種對羥基苯甲酸酯類各自氣相色譜檢測結果的重復性（RSD）<5%。

凈化效果好

1）方法包和國標方法預處理后的未加標醬油樣品色譜圖對比

2）經方法包預處理的加標醬油樣品色譜圖

3）4種對羥基苯甲酸酯類標準色譜圖