2023-02-20
液相色譜是我們實驗室常用的定性定量分析儀器之一,各行各業(yè)的研發(fā)及質(zhì)檢實驗室都會有他們的身影。今天我們來盤點一下,那些年我們用的液相色譜檢測器。
我們更常見更常用的就是紫外檢測器,大多數(shù)適用于液相分析的有機物都有紫外吸收,紫外檢測器是專屬檢測器,靈敏度高,操作相對簡單。據(jù)有關(guān)文獻(xiàn)收錄,紫外檢測器在液相檢測器中的使用占比可高達(dá)65%左右。
高效液相色譜儀檢測器使用比例
不同的檢測器各有優(yōu)缺點,下表為常見幾種檢測器的比較:
1. 紫外檢測器
UV檢測器分為固定波長檢測器、可變波長檢測器(VWD)和光電二極管陣列檢測器(PDA或DAD)。按光路系統(tǒng)來分,UV檢測器可分為單光路和雙光路兩種??勺儾ㄩL檢測器又可分單波長(單通道)檢測器和雙波長(雙通道)檢測器。
紫外檢測器通常都是先分光,取得單色光再通過流通池,然后用光電二極管檢測,因此只能獲得特定波長的信號。它的工作原理是由光源產(chǎn)生波長連續(xù)可調(diào)的紫外光或可見光,經(jīng)過透鏡和遮光板變成兩束平行光,無樣品通過時,參比池和樣品池通過的光強度相等,光電管輸出相同,無信號產(chǎn)生;有樣品通過時,由于樣品對光的吸收,參比池和樣品池通過的光強度不相等,有信號產(chǎn)生。
紫外檢測器光路圖
二極管陣列檢測器則是復(fù)色光先通過流通池,再分光,整個光譜由二極管陣列檢測,因此能獲得一段光譜范圍內(nèi)的所有信號。PDA(或DAD)是一種光學(xué)多通道檢測器,它可以對每個洗脫組分進行光譜掃描,經(jīng)計算機處理后,得到光譜和色譜結(jié)合的三維圖譜。其中吸收光譜用于定性(確證是否是單一純物質(zhì)),色譜用于定量。
二極管陣列檢測器光路圖
UV檢測器的典型光源為氘燈,它發(fā)出的光在190~400nm的波長范圍內(nèi)有適宜的光強度。它的定量原理是Lambert-Beer定律,即當(dāng)一束單色光透過流通池時,若流動相不吸收光,則吸收度A與吸光組分的濃度C和池的光徑長度L成正比。
2. ELSD檢測器(ELSD的檢測原理分三步):
● 霧化過程
用惰性氣體或凈化空氣將色譜柱流出物霧化,流動相和氣體混合噴成均勻的霧滴。
● 蒸發(fā)過程
在漂移管中將流動相揮發(fā),霧滴經(jīng)過加熱的漂移管,流動相被蒸發(fā),溶質(zhì)形成極細(xì)的顆粒。
● 檢測過程
測定留下來的樣品顆粒的光散射,溶質(zhì)顆粒氣流在檢測池被光束照射,其散射光被光電二極管轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘栞敵觥?/p>
ELSD可作為高效液相色譜、高速逆流色譜、超臨界流體色譜等色譜的檢測器。作為新型的通用型檢測器,它具有以下優(yōu)點:
● ELSD檢測不依賴于樣品的光學(xué)性質(zhì),只要沸點小于流動相的物質(zhì),都可以在ELSD上產(chǎn)生響應(yīng)。
● ELSD可以很好的支持梯度洗脫,蒸發(fā)光散射檢測可以消除流動相配比變化對基線產(chǎn)生的影響。
● 輔助載氣提高了檢測靈敏度,保持檢測池內(nèi)的清潔,避免污染。
但是,相對于UV檢測器,ELSD檢測也有一定的特殊性。ELSD檢測要求流動相及流動相中加入的修飾劑必須有良好的揮發(fā)性,這樣就使非揮發(fā)性的緩沖鹽的應(yīng)用受到了限制。與UV檢測器相比,ELSD檢測的靈敏度略低。
紫外檢測器及蒸發(fā)光散射檢測器是我們實驗室常用的兩類檢測器,月旭科技可提供多種不同類型的液相色譜檢測器,其中ELSD5450可兼容國內(nèi)外多種品牌的液相色譜儀,成為您實驗室液相擴展的得力幫手。
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