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高效液相色譜日常維護(hù)要點(diǎn)-沖洗

2022-07-28

哈嘍哈嘍大家好,小編又來了。之前小編已經(jīng)帶大家詳細(xì)了解了脫氣和過濾的基本原理和一些日常處理方法,今天就帶大家來了解一下高效液相色譜日常維護(hù)更后一個(gè)要點(diǎn)-沖洗。

相信各位老師一定深有感觸,要使HPLC系統(tǒng)能夠良好運(yùn)行的第三個(gè)要點(diǎn)是保持液相系統(tǒng)的清潔。日常使用時(shí),我們需要關(guān)注流動(dòng)相流經(jīng)該系統(tǒng)的所有地方,一般都是建議對(duì)儲(chǔ)液瓶,泵,自動(dòng)進(jìn)樣器,色譜柱,檢測(cè)器這些地方做經(jīng)常性的沖洗,這樣將會(huì)使你的系統(tǒng)隨時(shí)保持更佳狀態(tài)。

01 儲(chǔ)液瓶

首先流動(dòng)相應(yīng)根據(jù)用量合理配置,建議更好是現(xiàn)配現(xiàn)用。其次的話要經(jīng)常清洗流動(dòng)相儲(chǔ)液瓶,更好是更換一次流動(dòng)相沖洗一次儲(chǔ)液瓶。

我們又可以分為幾種不同沖洗方式。

一般清洗:直接用純化水沖洗。適用于盛裝純甲醇、純乙腈的貯存。

正常清洗:加入適量洗潔精,用毛刷刷洗;之后用純化水沖洗干凈。

干凈的標(biāo)準(zhǔn):水不成股流下,也不掛壁。適用于盛裝含有緩沖鹽或無機(jī)酸等流動(dòng)相的貯存瓶。

重點(diǎn)清洗:先用稀硝酸或鉻酸洗液潤洗,再用正常清洗項(xiàng)下的方法清洗。適用于有可能長霉的貯存瓶清洗,如夏天存放含大比例無機(jī)相的瓶子,以及存放流動(dòng)相時(shí)間超過15天的瓶子。

清洗干凈標(biāo)準(zhǔn)除正常清洗項(xiàng)下規(guī)定外,同時(shí)用pH試紙測(cè)定,使其達(dá)到中性(純化水的pH值)。一定要保證更后的瓶子流出的水為中性,否則可能會(huì)對(duì)液相色譜儀或色譜柱造成損壞。

02 泵

接下來要沖洗的是泵。特別是當(dāng)流動(dòng)相中含有難揮發(fā)的緩沖液(如磷酸鹽)時(shí)。如果儀器不是連續(xù)使用,當(dāng)流動(dòng)相蒸發(fā)時(shí), 難揮發(fā)物就會(huì)粘在活塞密封墊的表面,難揮發(fā)物將形成固形物沉淀。這是泵密封墊磨損和單向閥滲漏的主要原因之一。

所以,無論使用長短,在停泵以前一定要用非緩沖液流動(dòng)相沖洗泵在半個(gè)小時(shí)以上,要是流動(dòng)相中有難揮發(fā)緩沖鹽則建議沖洗的時(shí)間應(yīng)該更長些。

03 管路

針對(duì)管路的沖洗,如果以常規(guī)有機(jī)相試劑作為流動(dòng)相的系統(tǒng),建議每次實(shí)驗(yàn)完成后,用高比例有機(jī)相沖洗系統(tǒng)90分鐘以上(90%的甲醇水溶液,或者用90%乙腈水溶液)。

如果流動(dòng)相中含有酸堿鹽的的系統(tǒng),建議先斷開保護(hù)柱和色譜柱,用純水沖洗泵和進(jìn)樣器管路30分鐘(流速1.0mL/min),沖洗過程中應(yīng)保證進(jìn)樣器分別在load和inject狀態(tài)各沖洗15min,之后應(yīng)進(jìn)行過渡,首先用高比例水相(10%甲醇水溶液,或者用50%乙腈水溶液)過渡系統(tǒng)90分鐘,之后再用常規(guī)有機(jī)相試劑作為流動(dòng)相系統(tǒng)方法沖洗。

04 自動(dòng)進(jìn)樣器

自動(dòng)進(jìn)樣器也要按規(guī)定清洗?,F(xiàn)在的儀器多配有自動(dòng)進(jìn)樣器的沖洗液瓶,通常只要注意及時(shí)更換、補(bǔ)充沖洗液即可。

05 色譜柱

色譜柱的污染也會(huì)隨使用時(shí)間而增加。通常表現(xiàn)是:色譜柱壓升高,峰形異常,柱效下降,分離度異常等。

預(yù)防這個(gè)問題的更有效方法:在每一批樣品分析結(jié)束后或準(zhǔn)備卸下柱子時(shí),將我們的色譜柱按照對(duì)應(yīng)的說明書做好日常維護(hù)工作。

06 檢測(cè)器

針對(duì)檢測(cè)器的沖洗,可以依據(jù)檢測(cè)器其性質(zhì)并按照說明書規(guī)定進(jìn)行洗。例如UV/VIS檢測(cè)器或FL檢測(cè)器,在對(duì)柱子和系統(tǒng)進(jìn)行沖洗時(shí)也就一同對(duì)檢測(cè)器流通池中污染物進(jìn)行了清洗。但是蒸發(fā)光檢測(cè)器或質(zhì)譜儀則需要按照說明書進(jìn)行定期清洗。這些檢測(cè)器在使用時(shí)會(huì)有難揮發(fā)污染物沉積,如質(zhì)譜儀離子源的噴針、毛細(xì)管、錐孔板、預(yù)四極等部件,因而需要定期清洗。

到此,針對(duì)高效液相色譜日常維護(hù)要點(diǎn)就給大家介紹的差不到了,如果想要實(shí)驗(yàn)室日常使用的液相色譜儀能夠正常高效的運(yùn)行,以上日常維護(hù)都是必不可少的。


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