2022-06-23
今天小編再給大家分享一些注意事項:
方法調(diào)整 有機相,pH值,進樣量,柱溫等。 有機相 案例 色譜條件 色譜柱:月旭Ultimate? XB C18(4.6×250,5μm)。 流動相:A相:磷酸鹽緩沖液(磷酸二氫鉀6.8g/L,磷酸調(diào)整pH=2.5); B相:甲醇/乙腈/四氫呋喃; 檢測器:280nm; 柱溫:30℃; 流速:1.0ml/min; 進樣量:10μL; 樣品溶劑:A相; 樣品溶液:L-去甲腎上腺素、腎上腺素、L-酪氨酸、多巴胺用溶劑配置成濃度均為:0.2mg/mL。 B相:6%乙腈
B相:10%甲醇
B相:2.5%四氫呋喃
討論:在使用相似洗脫能力的有機相比例的情況下,同時檢測L-去甲腎上腺素、腎上腺素、L-酪氨酸、多巴胺4種物質(zhì),常用的甲醇,乙腈,四氫呋喃三種有機溶劑具有不同的分離結(jié)果,可以根據(jù)表《溶劑的選擇性特征》進行篩選。
pH值
討論:針對于易解離的物質(zhì),不同的pH會導致物質(zhì)的解離程度不一樣,進而引起保留時間的差異,反相離子對色譜法中需要物質(zhì)成為統(tǒng)一的解離狀態(tài)。