流動相 | 保質(zhì)期

各位老師知道流動相的保質(zhì)期有多久嗎，經(jīng)常遇到有老師前來咨詢“咱們的流動相能放多久啊，放一星期沒事吧”。但是老師，您知道嗎，流動相放的時間太長，可是會直接影響您的實驗結(jié)果呢。在這里就給各位老師說道說道流動相的注意事項。

流動相一般貯存于玻璃、聚四氟乙烯或不銹鋼容器內(nèi)，不能貯存在塑料容器中。因許多有機溶劑如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑劑，導(dǎo)致溶劑受污染。這種被污染的溶劑如用于HPLC系統(tǒng)，可能造成柱效降低。貯存容器一定要蓋嚴(yán)，防止溶劑揮發(fā)引起組成變化，也防止氧和二氧化碳溶入流動相。

磷酸鹽、乙酸鹽緩沖液很易長霉，應(yīng)盡量新鮮配制使用，不要貯存。如確需貯存，可在冰箱內(nèi)冷藏，用前應(yīng)重新濾過。容器應(yīng)定期清洗，特別是盛水、緩沖液和混合溶液的瓶子，以除去底部的雜質(zhì)沉淀和可能生長的微生物。

流動相使用前用0.45μm濾膜過濾、脫氣，清除微粒和灰塵。在送液泵內(nèi)，為了防止雜物（固體）進入流路，裝有吸濾器，但網(wǎng)孔徑為10μm，比此更小的顆粒仍然可通過，這會導(dǎo)致流路和柱子堵塞和污染。為此，建議常用0.45μm濾膜過濾。流動相溶劑須經(jīng)脫氣，如不脫氣，在溶劑混合時，或壓力溫度變化時容易產(chǎn)生大量氣泡，會導(dǎo)致泵誤動作和輸液不暢，檢測器產(chǎn)生噪聲信號等。

流動相恢復(fù)到室溫后使用。流動相溫度與室溫相差時，流動相在恢復(fù)到室溫前，基線水平很難穩(wěn)定，特別是發(fā)生漂移，也容易產(chǎn)生氣泡等現(xiàn)象。水與有機溶劑混合時，混合液變化大，往往會與室溫相差很大，務(wù)必注意。

五：避免使用帶有腐蝕性流動相流動相含有濃硫酸、濃硝酸、二氯乙酸、二氯甲烷、丙酮、四氫呋喃、二甲亞砜等溶劑，會對流路中的PEEK樹脂管路強度變差、PEEK樹脂管容易破裂使溶劑外濺。流動相含有鹵素離子的溶劑，如KCl、NaCI、NH4CI等。對流路中的不銹鋼材料有腐蝕作用，以上的溶劑須盡量避免使用。非用不可時，分析完了后，應(yīng)立刻用蒸餾水把全流路清洗干凈。

所謂的pH值，是基于水為溶劑的體系才叫pH值，所以正確的調(diào)節(jié)緩沖溶液pH值的做法是在水溶液中進行。如果添加了有機溶劑后再測量pH值，這其實與添加之前測量的pH值會有所不同。

然而，更重要的一點是操作習(xí)慣要保持一致。如果習(xí)慣是在添加有機溶劑之后測量pH值，那只要確保每次的操作都是如此就可以了。雖然這樣操作不是1OO%的準(zhǔn)確，但至少它與之前的做法是一致的。這對于一個完整的研究來說，相較之你在添加有機溶劑之前測量pH值而獲得了一次準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)來說，保持一致的操作方法可能會更重要。

假如流動相準(zhǔn)備的不夠充足，除了存在一定的泵和色譜柱空運行的風(fēng)險外，還會有其它的問題存在。如由于溶液中水會從試劑瓶的上方蒸發(fā)，所以試劑瓶頂部流動相的成分已經(jīng)發(fā)生了改變。如果使用了瓶中更后這部分試劑，事實上它們就是原來試劑瓶中頂部的那部分，當(dāng)它們通過色譜柱時可能會有渣滓滯留在色譜柱中。

超聲法對于確保所用的緩沖鹽完全溶解很有效，但它不是更有效的脫氣方法，而且由于超聲時溶液會快速升溫而導(dǎo)致流動相中有機試劑蒸發(fā)。為了節(jié)省時間，可以花5min時間通過真空過濾機來過濾流動相，這可以一步達到脫氣和過濾的兩個目的。